三种不同乳酸菌对凡纳滨对虾生长、抗病力及肠道菌群结构的影响

本研究比较了饲料中添加粪肠球菌(Enterococcus faecalis LYB1)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus W2)和凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans NJ17)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼虾的生长、抗病力及肠道菌群结构的影响。以基础饲料中分别添加1.0×1010 cfu/kg浓度的3种不同乳酸菌为实验组,以基础饲料为对照组,以投喂方式养殖对虾42 d。养殖结束后,进行14 d的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)攻毒实验。研究表明:投喂3种乳酸菌的实验组对虾的体重、特定生长率、饲料效率和表观消化率均显著高于对照组(P<0.05),其中以添加凝结芽孢杆菌组效果最佳。攻毒实验显示,添加粪肠球菌和嗜酸乳杆菌均可显著降低对虾的累计死亡率(P<0.05)。添加乳酸菌的各实验组对虾的肠道细菌群落结构与对照组相比均发生了明显变化,其中以添加粪肠球菌组差异最大。在门水平上,变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)为对虾肠道优势菌群。在纲分类水平上,α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)、丹毒丝菌纲(Erysipelotrichia)和黄杆菌纲(Flavobacteriia)为对虾肠道优势菌群。研究结果显示,凝结芽孢杆菌NJ17对凡纳滨对虾促长效果最佳,而嗜酸乳杆菌W2对对虾抗病力提高效果最佳,3种乳酸菌均明显改善了对虾肠道微生物群落的组成和丰度。     

饲料中添加两株乳酸菌及其发酵上清液对凡纳滨对虾消化酶活性的影响

为了探讨前期实验获得的益生菌及其发酵上清液对凡纳滨对虾消化功能的影响,将初始体质量3.5 g±0.06 g的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)在30℃±2℃环境下于水族箱中养殖4周。以基础饲料为对照组,在基础饲料中分别添加戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)HC-2、粪肠球菌(Enterococcus faecium)NRW-2、戊糖乳杆菌HC-2的发酵上清液,最终每克基础饲料中含有1.0×107 CFU益生菌或此菌量所对应的发酵上清液,共配制3组实验饲料。实验结果如下:与对照组相比,各实验组对虾肠道中蛋白酶活力显著提高(P0.05),但肝胰腺中蛋白酶活力无显著差异;添加NRW-2的实验组与对照组相比,肠道和肝胰腺中淀粉酶和脂肪酶活力均显著提高(P0.05),HC-2组对虾肝胰腺中淀粉酶及肠道中脂肪酶的活力显著提高(P0.05),而HC-2发酵上清液的添加仅显著提高了对虾肠道蛋白酶和淀粉酶的活性。结果表明饲料中添加NRW-2、HC-2及其发酵上清液可以提高凡纳滨对虾肠道及肝胰腺中消化酶的活力,但在不同组织中提高消化酶活性的种类是不同的,为水产养殖安全投入品的开发及乳酸菌在水产养殖中的推广应用提供一定的科学依据。     

Benthic diatoms of an Alpine stream/lake network in Switzerland

We compared the benthic diatom composition of lakes, and lake inlet and outlet streams in a high elevation catchment (∼2600 m a.s.l.) in the Swiss Alps. The catchment consisted of a southern basin mostly fed by glacial-melt water and a northern basin fed by snowmelt and groundwater. Streams in both basins flowed through a series of small lakes before converging into a lake with a primary outlet channel. The south basin had on average 4°C cooler water temperatures and 2× higher nitrate-N levels (up to 300 μg/L) than the north basin. In contrast, the north basin had higher levels (2–4×) of particulate-P, particulate-N, and particulate organic matter than the south basin. A total of 109 and 143 diatom species was identified in lakes and streams, respectively, with a similar number of species found in each basin. Aulacoseira alpigena and Achnanthidium minutissimum were common benthic algae in north basin lakes, whereas Achnanthes subatomoides, Achnanthes marginulata, Pinnularia microstauron, and Psammothidium helveticum were most common in south basin lakes. One disconnected lake in the north basin had an assemblage dominated by Tabellaria flocculosa (66%) and Eunotia tenella (14%). Principal components analysis showed a clear separation between the north and south basins in lotic diatoms. Of the 10 most common species, streams in the south basin had greater abundances of Psammothidium helveticum, Achnanthes helvetica var. minor, Achnanthes marginulata, Achnanthes subatomoides, and Diatoma mesodon than the north basin, whereas north basin streams had higher abundances of Achnanthidium minutissimum, Aulacoseira alpigena, and Luticola goeppertiana. Lake outlet assemblages were similar to respective downstream lake inlet assemblages, and assemblages changed in composition along each basins longitudinal flow path. However, Aulacoseira alpigena had higher average abundances in north basin outlets than inlets, and Achnanthidium minutissimum, Psammothidium helveticum, and Achnanthes helvetica var. minor had higher average abundances in south basin outlets than inlets. In contrast, Diatoma mesodon, Fragilaria capucina, and Gomphonema parvulum had higher average abundances in south basin inlets than outlets. The spatial patterns in species composition reflected the hierarchical interaction of landscape features (geology, hydrology) on longitudinal gradients (lake position) in the stream/lake network.     

植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)对云龙石斑鱼生长、抗氧化性能及血清生化水平的影响

植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)常作为饲料添加剂,可抑制鱼类病原菌生长,增加机体对饲料的消化和吸收。探讨了饲喂不同添加量的植物乳杆菌对云龙石斑鱼(Epinephelus moara♀×E.lanceolatus♂)生长性能、肠道消化酶活性、肠道和肝脏抗氧化能力、血清生化水平的影响,以期为植物乳杆菌在其健康养殖中的应用提供依据。结果显示,随植物乳杆菌的饲喂量增加,云龙石斑鱼的终末均重(FAW)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和肠道中淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)和糜蛋白酶(CHY)、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化均呈现先升高后降低的趋势。而随着植物乳杆菌的饲喂量增加,云龙石斑鱼的血清中总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、胆固醇(TC)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)均略降低,甘油三酯(TG)略升高,但与对照组差异不明显(P>0.05)。当添加量为1×10⁵CFU/g时,云龙石斑鱼的各生长指标和抗氧化性能均优于对照组,其中增重率显著提高了19.8%(P<0.05),肠道T-AOC、SOD分别显著升高了93.2%、2.9%(P<0.05),肝脏MDA显著降低了32.7%(P<0.05)。当添加量为1×10⁷CFU/g时,云龙石斑鱼的终末均重、增重率、特定生长率均显著高于对照组和其余添加组(P<0.05);饲料系数显著低于对照组(P<0.05);肠道的AMS、LPS、CHY活性分别显著提高了13.0%、166.9%、61.1%(P<0.05);但肠道和肝脏的抗氧化性能变化不明显,仅肝脏MDA显著降低了23.9%(P<0.05)。由此表明,饲料中添加一定量的植物乳杆菌可以提高肠道消化能力和抗氧化能力,促进云龙石斑鱼的生长,但对其血清生化水平无显著性影响,不会对鱼体代谢产生不良作用。     

生物技术清洁生产替代高污染化学法制备甲壳素的研究与应用

从虾壳中分离到一株乳杆菌BR-3,研究发现其最佳发酵起始pH为6.50,最佳培养温度为35℃,在此培养温度下达到对数生长期的时间为42h。采用乳杆菌发酵方法,进行了虾壳制备甲壳素的研究,比较了接种量、葡萄糖加入量、发酵时间等因素对产品质量的影响。结果表明,当接种量为10%、葡萄糖浓度为4.5%、固液比为1︰3、发酵温度为(35±2)℃、发酵时间为3—4d时,平均灰分去除率达95.67%,甲壳素产品灰分含量均小于6%,最低可达1%,产品质量等于或优于传统的酸碱生产方法。发酵液可部分或全部回收,洗涤废水可作下一轮发酵用水,生产废水接近零排放。虾壳乳酸发酵法生产甲壳素是一种清洁生产方法。BR-3培养时间短,培养条件粗放,温度和pH适应范围宽,产酸效率高,残糖少,适合于工业化生产。     

乳酸菌胞外产物对副溶血弧菌抑制作用的研究

对副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）有抑制作用的3株乳酸菌，分别命名为A-1，A-2，A3，并对其胞外产物的抑制作用进行了研究。结果表明．3株乳酸菌胞外产物对副溶血弧菌有较强抑制作用，抑菌圈直径分别可达18．6，20．3，19．5mm；抑菌物质对热处理不敏感：在60，80℃抑菌活性基本不变，在121℃处理20rain条件下抑菌效果分别是原液的67％，83％，74％，蛋白酶K处理对其活性有较大影响，抑菌成分可能是细菌素。进一步研究了细菌素抑菌活性与乳酸菌培养时间的关系。根据形态特征和常规生理生化反应进行鉴定，A-1，A-2鉴定为嗜热链球菌，A3鉴定为嗜酸乳杆菌。     

饲料中添加戊糖乳杆菌HC-2对黄曲霉毒素B1刺激下的凡纳对虾肝胰腺显微结构、基因表达及酶活性的影响

为探究饲料中添加戊糖乳杆菌HC-2对黄曲霉毒素B1（AFB1）刺激下的凡纳对虾肝胰腺显微结构、基因表达及肝胰腺酶活性的影响，将健康的凡纳对虾（900尾）随机分成三组，分别投喂基础饲料、添加AFB1（500 μg/kg）饲料以及添加AFB1（500 μg/kg）+戊糖乳杆菌HC-2（5×10⁸ CFU/g）饲料6周。在试验结束后，分别取三组对虾的肝胰腺进行显微观察以及免疫相关基因和肝胰腺酶活性的测定。AFB1+HC-2组肝胰腺组织同AFB1组相比损伤程度较轻。同对照组相比，AFB1组和AFB1+HC-2组的肝胰腺免疫基因Rab、GST、mucin-like PM、Dorsal、Relish、Pro-PO的相对表达量均呈现显著下调（P<0.05），且同AFB1组相比，AFB1+HC-2组的免疫相关基因GST、Dorsal、Pro-Po的相对表达量下调的较少（P<0.05）。同对照组相比，AFB1组和AFB1+HC-2组的碱性磷酸酶活性（AKP）明显上升，且AFB1+HC-2组的AKP活性要高于AFB1组。同对照组相比，AFB1组和AFB1+HC-2组中谷胱甘肽巯基转移酶（GST）活性明显升高但两组间无显著性差异，超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性在AFB1组和AFB1+HC-2组间无显著性差异，且三组的总抗氧化能力（T-AOC）无显著性差异。研究认为饲料中添加戊糖乳杆菌HC-2对AFB1刺激下的凡纳对虾肝胰腺组织结构有一定程度的保护作用，对部分免疫基因和碱性磷酸酶活性有显著影响，但对肝胰腺总抗氧化能力没有显著影响。     

两种海藻寡糖促乳酸菌增长的转录组比较研究

本研究采用全自动生长曲线分析仪Bioscreen C,比较了不同浓度的新琼四糖、新琼六糖、龙须菜发酵液、低聚果糖、低聚木糖、葡萄糖对乳酸菌Lactobacillus plantarum的促增长作用。结果显示,葡萄糖和龙须菜发酵液最佳的添加浓度分别为0.4 g/L和0.8 g/L,而新琼四糖、新琼六糖、低聚果糖、低聚木糖均为0.6 g/L。在各自的最佳浓度下,促生长效果最好的依次为新琼四糖、低聚果糖、新琼六糖、龙须菜发酵液、低聚木糖和葡萄糖。进一步比较在最佳添加量(0.6 g/L)和低浓度(0.2 g/L)条件下,新琼四糖和新琼六糖对乳酸菌Lactobacillus plantarum的转录组的影响,发现新琼四糖和新琼六糖在促乳酸菌生长的作用机理上有很大的相似性,当浓度升高时对细胞内的“转运活性”有更高的影响。